Purple Cap Vacuum Bloedverzameling CF-DNA

Wegwerp vacuüm bloedafnamebuis met DNA-conserveermiddel
 

Productgebruik
Crsin Shanghai ORSIN Medical Technology Co., Ltd. Wegwerp vacuüm bloedafnamebuis (DNA-conserveermiddel)
Cell-free DNA (cfDNA) in bloed wordt veel gebruikt als klinische biomarker. De belangrijkste technische uitdagingen die de klinische toepassing van cfDNA beperken, zijn echter interferentie van genomisch DNA (gDNA), cfDNA-degradatie, crosslinking-reacties en het behoud van celactiviteit. Daarom pakt de ORSIN-buis deze problemen effectief aan.
Dit product wordt gebruikt voor veneuze bloedopslag en -transport, evenals voor het stabiliseren van daaropvolgende cfDNA-detectie. Het is een vacuüm glazen/PET bloedmonster afnamebuis. Het product is geschikt voor niet-invasieve prenatale screening, vroege diagnose van tumoren, evaluatie van de werkzaamheid en gerelateerd onderzoek.
Producteigenschappen

Producteffectiviteit

De prestaties van de ORSIN-buis werden vergeleken met die van EDTA, Competitor Tube 1 en Competitor Tube 2. De evaluatie-indicatoren omvatten: 1) het voorkomen van de afgifte van cellulair genomisch DNA; 2) het remmen van cfDNA-degradatie en het handhaven van cfDNA-stabiliteit; 3) crosslinking-reacties tussen nucleïnezuren en andere biomoleculen; en 4) het handhaven van celactiviteit voor compatibiliteit met celnucleïnezuurtests. De belangrijkste evaluatiemethoden waren: kwantitatieve analyse van verschillende genen en 2100-testen voor gDNA-afgifte; evaluatie van cfDNA-degradatie met behulp van exogene synthetische DNA-sequenties en endogene genkwantificatie; en beoordeling van crosslinking-reacties op basis van 2100 piekdeviaties. Statische en transporttests toonden aan dat de ORSIN-buis 14 dagen bij omgevingstemperatuur kan worden bewaard en 7 dagen kan worden getransporteerd, waardoor gDNA-afgifte effectief wordt voorkomen en cfDNA-stabiliteit zonder degradatie wordt gehandhaafd. Het voorkomt ook hemolyse. In vergelijking met vergelijkbare producten heeft de ORSIN-buis aanzienlijke voordelen.

1 Statische test

De afgifte van genomisch DNA (gDNA) uit nucleaire cellen en cfDNA-degradatie werden onafhankelijk geëvalueerd om interferentie tussen deze twee indicatoren te voorkomen. EGFR-L858R (Figuur 1A) en Kras-G12D (Figuur 1B) wildtypes geven gDNA-afgifte aan. Met verlengde statische tijd vertoonde Competitor Tube 1 een significante toename van Cp-waarden na 3 dagen statische opslag in vergelijking met de ORSIN-buis. Exogene EGFR-L858R (Figuur 1C) en Kras-G12D (Figuur 1D) mutaties duiden op nucleïnezuurdegradatie. Testresultaten toonden aan dat Competitor Tube 1 meer degradatie had dan de ORSIN-buis. Binnen 14 dagen statische opslag was de ORSIN-buis significant effectief in het voorkomen van gDNA-afgifte uit nucleaire cellen en cfDNA-degradatie.

Figuur 1. 14-daagse statische opslagevaluatie van Competitor Tube 1 vs. ORSIN-buis

Twee DNA-fragmenten met EGFR L858R en Kras G12D mutaties (150bp) werden gesynthetiseerd en toegevoegd aan bloedafnamebuizen (één buis per tijdstip voor dezelfde gezonde persoon). Na 14 dagen statische opslag bij 25°C werd plasma gescheiden en werd cfDNA uit plasma geëxtraheerd (QIAamp® Circulating Nucleic Acid) voor qPCR-detectie. A) Detectie van EGFR L858R wildtype na 14 dagen statische opslag; B) Detectie van Kras G12D wildtype na 14 dagen statische opslag; C) Detectie van EGFR L858R mutatie na 14 dagen statische opslag; D) Detectie van Kras G12D mutatie na 14 dagen statische opslag; E) Hemolyse-evaluatie na 14 dagen statische opslag.